吖啶橙

吖啶橙

吖啶橙:3,6-(二甲胺基)吖啶盐酸盐,分子式C17H19N3 · HCl · ZnCl2, 分子量438.12g/mol,是一种萤光色素,其检测激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的萤光,与DNA结合量少发绿色萤光,与RNA结合量多发桔黄色或桔红色萤光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此,在萤光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀萤光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上緻密浓染的黄绿色萤光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄萤光减弱甚至消失。吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色萤光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞.它还可以用作移码突变的诱变剂,能镶嵌于两个相邻的硷基对之间,这样在DNA複製过程中,会使DNA链增加或缺失一个硷基,造成移码突变。吖啶橙染液有毒,操作时要戴手套,需避光。

2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,吖啶橙在3类致癌物(现有证据未能对人类致癌性进行分级评价)清单中。

    • 中文名:吖啶橙
    • 外文名:Acridineorange
    • 别名:硷性橙 14
    • EINECS:233-353-6
    • 分子量:369.96

名称信息

中文名称:

吖啶橙

中文别名:

硷性橙 14; 丫啶橙;3,6-双(二甲氨基)吖啶

CAS:

10127-02-3

MDL:

MFCD00081043

EINECS:

233-353-6

Beilstein:

3734978

分子式:

C17H19N3

英文名称:

Basic Orange 14;Basic Orange 14; C.I. 46005; 3,6-Bis(dimethylamino)acridine zinc chloride hydrochloride

分子量:

369.96

基本信息

简称:AO

AO能与无机酸形成盐,具有绿色萤光。如果再稀释的话,便水解成游离的AO,而呈现紫色萤光。

吖啶橙/溴化乙锭双萤光染色测定PC12细胞凋亡(acridine orange/ethidium bromide, AO/EB):

(1)细胞爬片:在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片,接种细胞悬液,干预后,予95%乙醇固定15分钟,微乾,然后準备萤光染色。将100mg/L溶于PBS的吖啶橙和100mg/L溶于PBS的溴化乙锭各5μl(临用前混合加入,加样量宜小,有时各2μl-5μl足够,量太大容易形成细胞凋亡的假阳性),在照相前混匀后加入,轻轻吹打,30秒后用雷射共聚焦显微镜观察照相。(有人用15mg吖啶橙溶于100ml pH6.8的PBS中过滤,避光保存)计取5个视野,共100个细胞中凋亡细胞百分数。

(2)如製成细胞悬液:取100μl PBS稀释的细胞悬液,加2μl的染色液,其中AO/EB,各含100μg/ml,加入染料30秒后观察摄像。

主要用途

用作萤光指示剂,肿瘤细胞及细菌、核酸染色剂及移码突变的诱变剂。

吖啶橙是一种萤光色素,吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的萤光(即着色特异性),这是由于DNA是个高度聚合物,吸收萤光物质的位置较少,发绿色萤光,而RNA聚合度低,能和萤光物质结合的位置多,故发红色萤光。

质量标準

项目 电泳级

λmax., 50 % EtOH:   490 - 495 nm

E 1 %/1 cm, λmax.:  > 1200 (EtOH 50 %)

乾燥损失Loss on drying:  ≤ 5 %

pH (1 %; H2O):  约4.0 (20°C)

品级Grade 分子生物学级,≥80.0%

(for molecular biology,Dye Content ≥80.0%(HPLC))

外观Appearance Red to Brown Powder

红外光谱Infrared spectrum Conforms to Structure

水溶性Solubility c = 1mg/ml; Water,Dark Orange to Amber, Clear

氮Nitrogen 8.5- 12.5 %

染料含量Dye Content (HPLC) ≥80.0%

物化性质

橙色粉末。溶于水、乙醇。溶液为橙黄色带绿色萤光。pH值为8.4~10.4则无萤光。能镶嵌于两个相邻的硷基对之间,使部分双螺旋DNA鬆开,该两个硷 基对的距离拉大一倍。这样的DNA複製过程中,会使DNA链增加或缺失一个硷基,造成移码突变。

熔点:165℃

相对密度:-

溶解性:soluble

安全信息

Risk:

R20/21/22Harmful by inhalation, in contact with skin and if swallowed.吸入、皮肤接触及吞食有害。R68Possible risk of irreversible effects.可能有不可逆后果的危险。

Safety :

S36/37Wear suitable protective clothing and gloves.穿戴适当的防护服和手套。S45In case of accident or if you feel unwell, seek medical advice immediately (show the label whenever possible.)若发生事故或感不适,立即就医(可能的话,出示其标籤)。

Hazard :

Xn-Harmful有害物品Xi-Irritant刺激性物品

致癌物说明

国际癌症研究所(IARC)对已进行致癌研究的化学物分为四类:一类,对人致癌性证据充分;二类,A组对人致癌性证据有限,但对动物致癌性证据充分,B组人致癌性证据有限,对动物致癌性证据也不充分;三类,现有证据未能对人类致癌性进行分级评价;四类,对人可能是非致癌物。

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