生物柴油（Biodiesel）又称为生质柴油，一般被定义为以动植物油或废食用油经转酯化、中和、水洗、蒸馏等化学过程所製造出的燃油。也就是用未加工过的或者使用过的植物油以及动物脂肪通过不同的化学反应製备出来的一种被认为是环保的生质燃料。这种生物燃料可以像柴油一样使用。
生物柴油最普遍的製备方法是酯交换反应。由植物油和脂肪中占主要成分的甘油三酯与醇（一般是甲醇）在催化剂存在下反应，生成脂肪酸酯。脂肪酸酯的物理和化学性质与柴油非常相近甚至更好。因为能经由动植物油脂等再生原料取得能源，所以也算是一种再生能源，并且可有效减少硫化物、粒状污染物、黑烟、一氧化碳、碳氢化合物等污染物的产生。
